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用途：
液相色谱法只要求样品能制成溶液
,
不受样品挥发性的限制
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流动相可选择的范围宽
,
固定相的种类繁多
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因而可以分离热不稳定和非挥发性的、
离解的和非离解的以及各种分子
量范围的物质。
与试样预处理技术相配合，
HPL
C
所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定
性质上十分相近的物质成为可能，
能够分离复杂相体中的微量成分。
随着固定相的发展
,
有
可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。由于
HPL
C
具有高分辨率、高灵敏
度、速度快、色谱柱可反复利用
,
流出组分易收集等优点
,
因而被广泛应用到生物化学、食
品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。液相色谱仪与结构仪器的联用
是一个重要的发展方向。
3.
测定原理
液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统，
样品溶液经进样器进入流动相
,
被流动相载入色谱柱
(
固定相
)
内
,
由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数
,
在两相中作相对运
动时
,
经过反复多次的吸附
-
解吸的分配过程
,
各组分在移动速度上产生较大的差别
,
被
分离成单个组分依次从柱内流出
,
通过检测器时
,
样品浓度被转换成电信号传送到记录
仪，数据以图谱形式打印出来。
液相色谱法用途
液相色谱法只要求样品能制成溶液, 不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。 与试样预处理技术相配合，HPL C 所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展, 有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。由于HPL C具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用, 流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。
液相色谱法测定原理
液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
液相色谱法注意事项
1.使用”保护柱”，能够延长色谱柱的使用寿命。简单的说，”保护柱”即是很短的色谱柱，填装和所使用液相色谱柱相同的填料。正确使用装在液相色谱柱前面的”保护柱”，可以阻拦一些容易损坏液相色谱柱的物质。而达到延长柱子寿命的效果。如果使用”保护柱”不当。会造成反效果。因为在保护柱使用过程中。如污染达到一定程度而没有及时更换，累积的杂物很可能会冲入色谱柱中，反而会造成色谱柱损坏。因此。使用”保护柱”时，重要的是要知道什幺时候该换保护柱。该换的时候就必须要立即更换。
2.选择高品质的柱子，并注意使用方法；可以延长柱子的使用寿命。一般认为同一厂牌、同一型号的柱子之间的品质都相同，对品质管理很严格的厂家而言，这说法是成立的。但如果厂家品质管理不够严格，即使是同一批号的新柱子之间的品质也有差异。所以，选用柱子时必须选择管理严格的高品质柱子，我们知道，任何柱子使用过后都会产生变化。尤其如在强酸或强碱条件下使用，柱子更易产生变化。因此，应尽量选用pH适用范围大的柱子。在开发新分析方法时，许多专家建议不要使用旧柱子。因柱子一经使用。柱性会改变；如此一来，使用旧柱子开发出来的新分析方法，很可能在再使用同厂牌的新柱子分析时。发生无法达到预定效果的情况。总的说。开发新分析方法时要使用品质好的新柱子；并且一支柱子好使用在一种分析方法上；则柱子寿命可以延长。
3.定期冲洗柱子可以延长柱子使用寿命。我们知道柱子使用一段时间后总会有一些杂质累积在柱内。这些杂质不会随着流动相出来，自然会逐渐影响柱子的品质。这些杂质在后来的分析谱图上出现。而造成出现怪峰、基线不平等现象。简单的解决方法是用较强的流动相冲洗。好是在每次分析某一产品完成后冲洗。如果分析时使用缓冲剂时﹐好用水来取代缓冲剂。先使用有机和水的混合溶液为流动相冲洗缓冲剂。接着再用100%有机溶剂冲洗。如果不先用有机和水的混合溶液冲洗，而直接用100%有机溶剂冲洗的话，缓冲剂很可能会沉淀出来，而损坏柱子的品质。使用10-20倍柱体积的量来冲洗基本就足够了。专家建议好将100%有机溶剂冲洗的条件加在分析实验程序完毕地后，如此一来每天在开机前都会用100%机溶剂冲洗。一般硅胶柱可以反冲洗处理﹐即是在将冲洗前将柱子倒反接后再冲洗。打算使用反冲洗处理前，好先参考柱子的保养说明书。所以要真正保护柱子，使柱子的寿命延长，好是使用”保护柱”和定期冲洗柱子
