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分光光度法校准原理

更新日期: 2015-05-13
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分光光度计法校准原理是将混合有特殊物质的液体——即溶剂(英文solution),通过移液器量取后注入目标容器,然后通过使用特定的滤波片过滤掉一部分不需要的波长的光后,再对剩余的特定的波长的光进行测量,从而由此计算出移液器实际吸取和排出的液体——即溶剂。由分光光度法校准的原理可见,在采用分光光度法对移液器校准的过程中,可能对校准结果带来影响的因素主要有:
1 温度,因为分光光度法同样需要使用到液体即溶剂,一定质量量的溶剂,其容积同样受到温度的影响而变化。但如果在用户所在的场所对移液器进行校准,则此影响可以不计,因为某一个具体用户所在的场所内的温度变化,相对来说是固定的,那么这种由温度带来的影响,同样也会存在于用户实际工作中,因此这两者是可以相互抵消的(乾芸仪器科技有限公司备注:目前在该领域较为成熟的技术来自于美国一家实验室);
2 气压,同温度带来的影响一样,由气压带来的影响也是可以相互抵消的;
3 操作人员的操作习惯带来的影响,因为分光光度法是可以被直接在终端用户使用场所应用的一种移液器校准方法,其操作方法相对于传统的衡量法(或称重法)更为简单、可靠,因此*可由移液器的使用者来直接对其使用的移液器采用分光光度法进行校准。这样操作者的操作习惯在校准过程中表现出来的差异同样存在与今后的使用过程中,这两者之间的差异也可以相互抵消的;
4 环境湿度,因为分光光度法不是对移液器排出的溶剂进行称量,而是对溶剂中所包含的特殊物质的光波进行测量,同时这种特殊物质是不可挥发的,因此在整个测试过程中,其已经通过移液器排出的溶剂,无论其质量如何变化,但结果是不会受到影响的,也就是不需要对环境的干湿度进行控制。
至此我们几乎可以说,针对移液器采用分光光度发进行校准,其整个的测试过程是几乎不受环境因素影响的,如温度、气压、干湿度等,同时因在这一校准过程中,校准人和终使用人可以做到是同一人,从而因人的因素而带来的差异也是降到低的。当然这种方法也不确定因素,比如分光光度法设备及使用的试剂自身也必然存在一定的误差,这与传统的衡量法(或称重法)里测量仪器自身的误差一样,比如电子天平自身的误差、温度计自身的误差、干湿度计以及气压计自身的误差等,但这些来自于测量设备、溶剂自身的误差,通常是恒定的,并且是可以事先测量、估算的,可以通过的测量数据进行修正的方法来避免的。
当然,目前分光光度法作为一种针对移液器校准的新的应用方法还是刚刚兴起,在国外也只有少数研究机构或实验室在使用,在我国目前仅停留在理论层面的评估上,并没有在实际中推广、应用。但因为分光光度法不受环境因素干扰,且设备携带方便,使得其应用环境更为随意、宽广,因此根据我们乾芸仪器科技有限公司多年的行业经验认为,这种新型的针对移液器校准的方法,在不久的将来,将会得到更多用户的肯定与承认。 
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